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你知道什么是瓊脂糖凝膠電泳嗎？
2023-10-25
你知道什么是你知道什么是瓊脂糖凝膠電泳嗎？讓我們一起來看看吧！一、瓊脂糖凝膠的特點核酸分子是兩性解離分子，在高于其等電點的電泳緩沖液中，其堿基不解離，而磷酸基團全部解離，核酸分子因而帶負電荷，電泳時向正極遷移。瓊脂糖主要從海洋植物瓊脂中提取而來并經糖基化修飾，為一種聚合鏈線性分子，使用瓊脂糖凝膠作為電泳支持介質，發(fā)揮分子篩功能，使得大小和構象不同的核酸分子的遷移率出現(xiàn)較大差異，從而達到分離的目的。因此，目前多用瓊脂糖為電泳支持物進行平板電泳，其優(yōu)點如下。（1）瓊脂糖凝膠電泳操...
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瓊脂糖凝膠電泳實驗的試驗方法是什么？注意事項有什么？
2023-10-25
你知道瓊脂糖凝膠電泳實驗的實驗方法是什么嗎？有什么注意事項呢？讓我們一起來看看吧！一、瓊脂糖凝膠電泳實驗方法1.擇適合樣品預期片段大小的瓊脂糖凝膠濃度百分比。將瓊脂糖粉末與用于運行凝膠的相同類型的緩沖液（TAE）結合起來，加熱使混合物融化，避免沸騰。2.選擇所需尺寸的凝膠澆注模具和梳子，為樣品和marker提供足夠數(shù)量的孔，以及容納每個待裝樣品數(shù)量的孔容量。3.膠凝固后，將凝膠放入電泳儀中，電泳液沒過凝膠，根據加入量的多少，決定混合多少ul的lodingbuffer，將樣液混...
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如何選擇DNA提取方法
2023-10-25
DNA的提取可以簡單的分為裂解和純化兩大步驟，裂解是破壞樣品細胞結構，從而使樣品中的DNA游離在裂解體系中的過程，純化則是使DNA與裂解體系中的其它成分，如蛋白質、鹽及其它雜質分離的過程。那么該如何選擇DNA提取方法呢？讓我們一起來看看吧！一、酚氯仿抽提法酚氯仿抽提是去除蛋白質的有效手段，但如果蛋白質含量超過了其飽和度，裂解體系中的蛋白質就不會被一次性去除，需要進行多次反復抽提，而每次的抽提均會導致核酸的損失。酚氯仿抽提的優(yōu)勢是成本低廉，對實驗條件要求較低。二、高鹽沉淀法高鹽...
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熒光原位雜交（FISH）的實驗步驟是什么？
2023-10-24
熒光原位雜交（FluorescenceinsituhybridizationFISH）是一門新興的分子細胞遺傳學技術，是20世紀80年代末期在原有的放射性原位雜交技術的基礎上發(fā)展起來的一種非放射性原位雜交技術。那么你知道熒光原位雜交（FISH）的實驗步驟是什么嗎？讓我們一起來看看吧！一、實驗材料準備1.實驗用具及材料（1）人的MyoD1（MYF3)基因探、人外周血中期染色體細胞標本；（2）指甲油、甲酰胺、氯化鈉、檸檬酸鈉、*、吐溫20等；（3）恒溫水浴鍋、培養(yǎng)箱、染色缸、載玻...
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蛋白表達的常見問題有哪些？
2023-10-24
蛋白表達實驗的時，有時候實驗會覺得參考實驗方法和克隆的蛋白基因序列wan全沒有問題，但蛋白電泳就是沒有結果。下面讓我們一起來看看蛋白表達的常見問題有哪些吧！1、載體構建錯誤，很多克隆新人經常弄錯讀碼框。比如Qiagen的pQE系列載體，其克隆位點常有一兩個堿基的區(qū)別；另外有些酶產生粘端有些酶產生平端，這些都容易導致讀碼框錯誤，從而表達不出來。2、宿主菌選擇不當，不同的宿主菌其基因型是不一樣的。有些經過特殊修飾的載體，或者特殊用途的載體，或者有特殊啟動子的載體，必須選擇合適的宿...
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PCR反應體系主要是什么？
2023-10-23
你知道PCR反應體系主要包含那些嗎？讓我們一起來看看吧！一、模板（template)模板即擴增用的DNA，可以是任何來源DNA(如基因組DNA、質粒DNA等)或RNA（如總RNA、mRNA、tRNA、rRNA、病毒RNA等），但必須符合兩個條件：一是純度必須較高，二是濃度不能太高以免抑制。模板是待擴增的目的基因或特異片段，如診斷病人是否攜帶有突變基因時，其模板就是提取的病人血液中的DNA或RNA片段。PCR對模板DNA的純度不要求很高，但應盡量不含有對PCR反應有抑制作用的雜...
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PCR技術的基本原理、各步驟的目的是什么？
2023-10-23
你知道PCR技術的基本原理、各步驟的目的是什么嗎？讓我們一起來看看吧！一、PCR技術基本原理PCR是一種選擇性體外快速擴增DNA片段的方法。在體外以類似于細胞內DNA的半保留復制過程，以擬擴增的模板DNA分子，與模板DNA互補的寡核苷酸引物、DNA聚合酶、4種dNTP及適合的緩沖體系組成的反應體系，經過重復地變性一退火一延伸三步，擴增新的目的DNA鏈，這個過程通過控制反應體系的溫度來實現(xiàn)。PCR包含下列三步反應：1、變性(denaturation)將反應體系混合物經加熱至94...
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如何選擇免疫組化中的一抗？
2023-10-20
免疫組化實驗看似容易，但真想把結果做漂亮，還是需要花上很長一段時間去積累和摸索經驗。一味按照網上操作流程來做，結果往往并不理想，最終結果未能達到預期的效果。那么如何選擇免疫組化實驗中的一抗呢？讓我們一起來看看吧！一、單克隆和多克隆抗體的選擇存在于抗原表面的，決定抗原特異性的特殊化學基團稱為抗原決定簇，又稱抗原表位。一個抗原可以有一種或多種不同的抗原表位，每種表位只有一種抗原特異性。用一種包含多種抗原決定簇的抗原免疫動物，可刺激機體多個B細胞克隆產生針對多種抗原表位的抗體，就是...
服務熱線：022-66387942
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